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Y1HGold菌株是GAL4-AbA酵母单杂系统用菌株,MATα型,可直接转化质粒进行筛库试验。Transformation marker为:ura3,leu2;报告基因为:AbAr。Y1HGold-GAL4-AbA 酵母单杂系统需要两种质粒配套使用:pAbAi 和PGADT7。质粒pAbAi的筛选标志为URA,用于表达pBait-AbAi construct (1~3个bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi中);质粒pGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白。此外AbAr与营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点,可降低酵母单杂假阳性发生的概率。Y1HGold感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存12个月,pGADT7质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。 |