BiFC
服务介绍
将荧光蛋白在某些特定的位点切开,形成不发荧光的N端和C端2个多肽,称为N片段(N-fragment)和C片段(C-fragment)。这2个片段在细胞内共表达或体外混合时,不能自发地组装成完整的荧光蛋白,在该荧光蛋白的激发光激发时不能产生荧光。但是,当这2个荧光蛋白的片段分别连接到1组有相互作用的目标蛋白上,在烟草叶片细胞内共表达这2个融合蛋白时,由于目标蛋白质的相互作用,荧光蛋白的2个片段在空间上互相靠近互补,重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子,并在该荧光蛋白的激发光激发下,发射荧光。简言之,如果目标蛋白质之间有相互作用,则在激发光的激发下,产生该荧光蛋白的荧光。反之,若蛋白质之间没有相互作用,则不能被激发产生荧光。
服务优势
▶高特异性:只有当目标蛋白相互作用时,荧光信号才会出现,减少了假阳性结果,提高了检测的特异性。
▶检测弱或瞬时相互作用:对低亲和力、短暂相互作用敏感,能够揭示一些传统方法难以检测到的相互作用。
服务流程

服务项目 | 应用 | 互补实验 |
BiFC | 验证与已知两蛋⽩是否互作 | Co-IP、LCA、B2H、Y2H |
服务项目 | 客户提供 | 最终交付 |
BiFC | 两个蛋白的基因序列及模板 | 滴原始数据、结果图片; 标准实验报告; SCI标准Result Figure。 |
文案展示
A plant RNA virus inhibits NPR1 sumoylation and subverts NPR1-mediated plant immunity
期刊:nature communications

Confocal microscopic photographs of N. benthamiana epidermal cells that were infiltrated by agrobacteria harboring the indicated plasmids at 2 dpi. Scalebar, 50 μm. The experiment was independently repeated three times with similar results. c.
适用领域
▶蛋白质互作网络研究:揭示复杂信号通路中蛋白质间的直接相互作用。
▶药物筛选与验证:检测候选药物对特定蛋白质相互作用的影响,评估其生物活性。
▶植物科学:研究植物生长发育、逆境响应、信号传递等过程中的关键蛋白质互作。
文 献
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