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pKT25载体
该载体属细菌双杂交系统(如 BACTH 系统)的核心载体之一,携带腺苷酸环化酶 N 端结构域(T25 片段)编码序列,多克隆位点位于 T25 基因下游,可插入入靶基因序列构建与 T25 的融合蛋白表达框。当与携带 T18 片段(腺苷酸环化酶 C 端结构域)的载体(如 pUT18、pUT18C)共转化大肠杆菌时,若两种融合蛋白发生相互作用,可使 T25 与 T18 重构为有活性的腺苷酸环化酶,催化 cAMP 合成并激活下游报告基因(如 lacZ),通过表型变化检测蛋白质间的相互作用。适用于原核生物蛋白质互作筛选、互作机制分析及功能验证。
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