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EBY.VW4000 Chemically Competent Cell
EBY.VW4000菌株来源于CEN.PK2-1C酵母菌株,MATa型,Transformation marker为ura3,可用于筛选标记为URA3的质粒的转化,比如pYES2/NT、pYC2/NT、pDR196、p416GDP、pESC-URA等质粒。酿酒酵母含有大量严格控制的具有不同特征的己糖转运蛋白,这些己糖转运蛋白有转运葡萄糖的潜力,大部分酵母中含有17个己糖转运蛋白(Hexose transporter)HXT1 - HXT17,CEN.PK2-1C只含有16个己糖转运蛋白(Hexose transporter)HXT1 - HXT16;GAL2:半乳糖渗透酶基因,为半乳糖利用所必须,同时具有运输葡萄糖的功能;还有三个麦芽糖转运蛋白家族成员(Agt1、Ydl247、Yjr160)能够运输己糖;此外,STL1(Sugar Transporter-Like protein)为质膜甘油质子同向转运体,也被认为参与到葡萄糖的转运代谢过程中。为了消除CEN.PK2-1C酵母对葡萄糖的摄取能力,利用Cre/LoxP系统将HXT1 - HXT16、GAL2、AGT1、YDL247w和YJR160c这些能够运输己糖的基因,加上STL1共21个基因全部删除,即是EBY.VW4000。EBY.VW4000作为己糖转运蛋白缺陷酵母菌株,其葡萄糖的吸收和转运活性被完全消除,其他己糖的吸收和转运能力也被消除,是发现和研究天然或异源(其他物种)己糖转运蛋白的高效试验平台。EBY.VW4000不能同化葡萄糖或其他己糖作为碳源,在含有2%麦芽糖的培养基中生长正常,培养WT细胞推荐使用YPM培养基;筛选含有质粒的酵母细胞推荐使用SM培养基。EBY.VW4000感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存12个月,pYES2质粒(5857bp,AmpR)检测转化效率>104 cfu/μg DNA。 特别强调: EBY.VW4000感受态极容易突变,因此EBY.VW4000感受态仅可一次性使用,切不可再次划线扩繁。如需自行制备感受态,请联系普因特购买原始EBY.VW4000菌株(货号SP8197),及超级酿酒酵母感受态制备及转化试剂盒(冻存型)(货号PT1183-DC)。
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。 |


