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酵母转录活性检测试剂盒
单纯疱疹病毒蛋白16 (herpes simplex virus protein,VP16)是一种转录激活因子,能够激活下游基因表达。将VP16转录激活区与GAL4BD 融合表达,构建pGBKT7-VP16(BD-VP16)载体,将其转化Y2HGold。VP16转录激活作用就会激活酵母体内报告基因HIS3、ADE2的表达,进而能够在组氨酸、腺嘌呤缺陷型培养基上正常生长。转录因子X分别与BD、BD-VP16融合表达,若转录因子X对下游基因为转录激活作用,会激活下游基因的表达。与含有BD的对照菌株相比,含有BD-X菌株能在缺陷型培养基上生长。若转录因子X对下游基因的转录抑制作用,进而会部分抑制VP16对下游基因的激活。与含有BD-VP16的对照菌株相比,含有BD-VP16-X菌株会抑制对下游的报告基因的激活,进而在缺陷型培养基上的生长会受到抑制。
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