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Y2HGold-GAL4系统酵母双杂筛库试剂盒(Mating法)
酵母双杂的原理基础:很多真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分割开的结构域,即DNA 特异结合域(DNA-binding domainBD)与转录激活域(Transcriptional activationdomain,AD)。这两个结构域各具功能,互不影响,但一个完整的激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域,否则无法完成激活功能。不同来源激活因子的 BD 区与 AD 结合后则特异地激活被BD 结合的基因表达。基于这个原理,可将两个待测蛋白分别与这两个结构域建成融合蛋白,并共表达于同一个酵母细胞内。如果两个待测蛋白间能发生相互作用,就会通过待测蛋白的桥梁作用使AD与BD形成一个完整的转录激活因子并激活相应的报告基因表达。通过对报告基因表型的测定可以很容易地知道待测蛋白系统分子间是否发生了相互作用。
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