SM10λpir Chemically Competent Cell

SM10λpir Chemically Competent Cell

SM10 λpir是从SM10菌株改造而来，SM10本身是S17-1菌株的衍生株。S17-1 是构建用于高效接合转移的经典菌株，它整合了RP4质粒（也称为 RK2 质粒）的接合转移装置（tra 基因）到其染色体上。整合的RP4赋予S17-1 (以及其衍生株 SM10) 将自身携带的可移动质粒高效地转移给受体菌的能力。在SM10的基础上，通过溶原化的方式，将λ噬菌体的一个特殊变体λpir 整合到了染色体上，即SM10-λpir，pir蛋白是R6K质粒复制起点 (oriR6K 或 oriV) 的特异性复制起始蛋白。只有表达pir蛋白的宿主细胞才能复制带有 oriR6K 复制起点的质粒。tonA: 对噬菌体T1具有抗性；lacY: β-半乳糖苷透性酶缺陷，影响乳糖利用；recA突变大大降低了菌株自身的重组能力，有助于保持引入质粒的稳定性，避免其与染色体或其他质粒发生不必要的重组；RP4-2-Tc:: Mu: 这是最核心的特征之一，这意味着完整的 RP4 质粒（RK2 质粒）的接合转移装置 (tra 基因) 被整合到了染色体上。这赋予了 SM10 (pir) 组成型表达接合转移功能的能力，使其能作为高效的供体菌；整合结构上还包含一个 Mu 噬菌体序列；带有四环素抗性标记。SM10 λpir的主要用途就是作为接合转移实验中的供体菌 (Donor)，目标受体菌可以是其他革兰氏阴性菌，如沙门氏菌、志贺氏菌、假单胞菌、耶尔森菌、霍乱弧菌等。SM10 λpir感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，Amp^R）检测转化效率>10⁶ cfu/μg DNA。

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