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生命科学研究

细菌双杂交

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服务介绍

细菌双杂交系统是在大肠杆菌研究中蛋白质与蛋白质相互作用的方法。这个系统是建立在转录活化作用基础上的并且包括细菌中两种融合蛋白质的合成,这两种蛋白质的相互作用可以激活报告基因的转录。这种细菌双杂交系统已经被用来研究从原核生物到真核生物的许多相互作用的蛋白质,也可以用来寻找复合物蛋白质文库中的相互作用的蛋白质

服务优势

通量高、周期短,极速锁定互作靶点:依托大肠杆菌高速生长特性,3-5天即可完成文库初筛,一周内获得验证结果。

体内检测、环境真实,特异性强背景低在活性细菌胞内环境中直接验证蛋白质互作,更能反映接近天然的折叠状态与互作环境。

从验证到发现,提供一站式解决方案我们不仅提供已知蛋白对的互作验证,更擅长执行大规模文库筛选(如基因组文库、突变体文库),并能进行关键互作结构域或残基的精准鉴定。

专业团队全程支持,数据交付清晰可靠配备经验丰富的项目科学家团队,从实验设计到数据分析提供一对一专业支持。

服务流程

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服务项目

应用

互补实验

细菌双杂交

筛选验证与已知蛋⽩互作的蛋⽩

COIPBiFCLCAY2H

 

服务项目

客户提供

最终交付

文库构建

组织/细胞

库容量大于或等于1×107cfu/均长大于或等于1000bp,插入基因阳性率大于或等于95%,交付量大于1000ug质粒文库。

文库筛选

基因序列/模板

筛选过程中的全部原始图片;筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

点对点验证

基因序列/模板

实验中全部原始图片、数据及展示图

文案展示

Highly conserved regulatory activity of theANR family in the virulence of diarrheagenic bacteria through interaction

with master and global regulators

期刊:Scientific Reports

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25 fusion plasmids for Ler, HNS, and Rnr were generated (A) and cotransformed in E. coli BTH101 strain. Positive Rnr–HNS and Rnr–Ler interaction were confirmed on plates (C). The β-galactosidase activity was determined in the BACTH system for strains cotransformed with HNS/Rnr and Ler/Rnr derivatives. (B,D) Represent two independent experiments run with different BACTH clones. As controls, the E. coli BTH101 strain was co-transformed with either empty vectors (pKNT25 and pUT18) (negative control) or vectors encoding two irrelevant proteins (pKNTAap, pUT18YicS). Plasmids encoding the zip fragment (pKT25-zip and pUT18-zip) were used as a positive control in the BACTH system (B–D). Asterisks indicate significant differences by ANOVA (**P<0.001)

适用领域

蛋白质相互作用研究:细菌双杂交技术广泛应用于研究蛋白质之间的相互作用网络。通过识别和验证蛋白质间的相互作用关系,可以揭示蛋白质复合物的组成和结构,从而深入了解细胞信号传导、转录调控、代谢途径等生物过程。

蛋白质功能研究:通过细菌双杂交技术,可以研究蛋白质的功能和调控机制。例如,通过识别蛋白质与转录因子、核酸结合蛋白等的相互作用,可以了解蛋白质在基因调控中的作用,以及调控网络的建立和维持。

药物研发:细菌双杂交技术可应用于药物研发领域。通过筛选药物分子与靶蛋白之间的相互作用,可以评估药物的潜在效果和副作用,优化药物设计,加速药物发现过程。

疾病研究:细菌双杂交技术可用于研究与疾病相关的蛋白质相互作用。通过筛选与疾病相关基因的相互作用蛋白质,可以揭示疾病的发生机制,寻找潜在的治疗靶点。

进化生物学研究:细菌双杂交技术可以用于研究物种间的蛋白质相互作用。通过比较不同物种中的相互作用网络,可以了解蛋白质相互作用的进化变化,探究物种适应性和进化的基础。

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