荧光素酶互补图像检测

服务介绍

荧光素酶互补图像检测是指当检测两种目标蛋白是否互作时，将荧光素酶分成N端(NLuc)片段2~416和C端(CLuc) 398~550两部分作为报告蛋白，将编码N端(NLuc)片段和C端(CLuc)片段的基因分别构建到不同的表达载体上得到N端载体和C端载体，在N端载体上N端(NLuc)片段的氨基端载入一种目标待检测蛋白的基因得N端检测载体，在C端载体上C端(CLuc)片段的羧基端载入另一种目标蛋白的基因得C端检测载体。将N端检测载体和C端检测载体的表产物混合在一起，目标蛋白下游两部分报告蛋白不会自发地装配起来，仅仅当与这两部分报告融合的目标蛋白之间可以互作时，两部分报告蛋白才能够正确地组装并产生活性，在加入发光底物后，可以通过特定仪器来检测其化学发光情况，如果发光情况判断两种目标蛋白之间是否存在互作。

服务优势

▶高灵敏度：LCA能够检测低至皮摩尔级别的蛋白质互作，这使得它非常适合于研究低丰度蛋白质的相互作用。

▶实时监测：由于荧光素酶催化反应迅速，且生物发光信号强，LCA能够实现实时监测蛋白质互作，无需固定或裂解细胞，从而减少了样品处理过程中的损失和变异。

▶非侵入性检测：LCA在活细胞内进行，不会破坏细胞结构，允许在生理条件下观察蛋白质互作，提供更真实的生物学环境下的互作信息。

▶动态范围宽：LCA能够覆盖广泛的互作强度，从弱到强的互作均可检测。

服务流程

文案展示

A flavonoid metabolon: cytochrome b5 enhances B-ring trihydroxylated flavan-3-ols synthesis in tea plants

期刊：The Plant Journal

Split-luciferase complementation assay analyses the spatial proximity between CsC4H, CsF30 H, and CsF30 50 H proteins in N. benthamiana tobacco leaves. N.C., negative control, inject empty vector pC1300-nLUC and pC1300-cLUC together; N.C.1–3, negative control, inject empty vector pC1300-cLUC and P450-nLUC together; N.C.4–6, negative control, inject empty vector pC1300-nLUC and cLUC-P450 together.

适用领域

▶蛋白质互作研究：LCA能实时监测活细胞内蛋白质间的直接或间接相互作用，为理解细胞信号传导、复合体组装及蛋白质网络提供数据。

▶植物科学：LCA在植物激素响应、抗逆境信号转导等领域有所应用，促进作物改良和农业生产。

▶信号转导分析：LCA帮助揭示信号蛋白如何在细胞内相互作用并传递信号，深入探究信号转导通路的分子机制。

▶病原体-宿主互作：LCA在解析病原体感染机制、宿主防御反应及免疫应答中发挥作用，增进对感染性疾病的理解。