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服务介绍 凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析;目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,是转录因子研究的经典方法。 验证型EMSA ⽤于验证探针是否含有可与蛋⽩质结合的位点。将结合位点突变,以突变探针为对照,野⽣型探针出现迁移条带,⽽突变探针未出现迁移条带,则说明该探针含有可与蛋⽩质结合的位点。 竞争型EMSA 探针序列不变,不含修饰基团的探针称为冷探针。冷探针与标记探针竞争性地与蛋⽩结合,冷探针不显影出迁移条带。以冷探针为对照,标记探针出现迁移条带,⽽冷探针迁移条带减弱或消失,则排除了假阳性⼲扰,增加实验结果准确性。 超迁移EMSA 使⽤⽬标蛋⽩的特异性抗体,蛋⽩-探针复合物被抗体识别并结合,该三聚复合物在凝胶电泳中,迁移速率再次增⼤,出现在蛋⽩-探针复合物的上方的超迁移条带,验证了探针与⽬的蛋⽩的特异性结合。 服务优势 ▶一站式服务:从基因设计、蛋白表达纯化到功能验证全程覆盖; ▶高成功率保证:严格的质量控制体系(SDS-PAGE、Western Blot等); ▶灵活性高:支持多种表达条件优化(温度、诱导时间等); ▶专业团队:提供密码子优化、载体构建、探针设计等增值服务; ▶数据可靠:实验报告包含原始数据、图表及详细分析说明。 服务流程
文案展示 Sclerenchyma cell thickening through enhanced lignification induced by OsMYB30 prevents fungal penetration of rice leaves 期刊:New Phytologist
Direct binding of OsMYB30 to the Os4CL3promoter. The probe was labelled with biotin at the 5 end. Wild-type (GATCAATCGC CGCCGCCGTC TCCTCG), mutant competitor-M8 (GATCAATAAAAAAAACCGTC TCCTCG), or mutant competitor-M3 (GATCAATCGC CGCCGCCAAA AAAAAG) oligonucleotides were used for competitive binding in 10-,and 50-fold excess of the wild-type probe. (e) Binding of OsMYB30 to the Os4CL5 promoter in EMSA. The probe was labelled with biotin at the 50 end.Wild-type (TCGCCGCCGCCGCCGCTGTCGCCGTCG), mutant competitor-1 (TCGCCGCAAA AAAAACTGTCGCCGTCG), or mutant competitor-2(TCGCCGCCGCCGCCGCTAAA AAAAACG) oligonucleotides were used for competitive binding in 10-, and 50-fold excess of the wild-type probe. 适用领域 ▶用于研究DNA结合蛋白和特定的DNA序列的相互作用。 ▶用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 上一篇RUBY互作检测下一篇荧光素酶报告基因检测 |

