RUBY互作检测

服务介绍

RUBY蛋白互作系统是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具，利用酵母双杂交原理，在植物活体内检测蛋白质相互作用的可视化的报告系统。其设计思路非常巧妙，将蛋白质相互作用直接转化为肉眼可见的颜色变化。

服务优势

▶结果直观可视化：无需任何复杂仪器，通过肉眼或普通相机即可观察判断。

▶操作简便，成本低廉：利用植物体内广泛存在的“酪氨酸”作为底物，无需添加任何昂贵的外源底物或化学试剂。

▶活体、原位检测：可以在完整的活体植株（如本氏烟草叶片）上进行检测，真实反映细胞内的互作情况，避免了样品处理带来的假象。

▶可用于定量分析：提取红色色素（甜菜红素）后，可通过分光光度计测量吸光度，对互作强度进行半定量分析。

服务说明

文案展示

A split GAL4 RUBY assay for visual in planta detection of protein–protein interactions

期刊：The Plant Journal

Interaction between N. benthamiana PAD4 and EDS1 proteins. UAS-RUBY containing Agrobacteria were co-infiltrated into N. benthamiana leaves with cultures containing: (1) GAL/VP16, (2) VP16/AvrP and GAL/NbPAD4 (negative control), (3) NbEDS1/VP16 and GAL/NbPAD4, (4) NbEDS1/VP16 and GAL/NbPAD4VLI,(5) NbEDS1LTVIV/VP16 and GAL/NbPAD4, (6) NbEDS1LTVIV/VP16 and GAL/NbPAD4VLI. Betalain was quantified 5 dpi spectrophotometrically (graph in middle) andby pixel intensity quantification (right-hand graph). Columns 1–6 on both graphs are the same samples and correspond to infiltration sites 1–6 on the leafshown. Common letters above graph boxes indicate no significant (P > 0.05; one-way ANOVA with post hoc Tukey HSD) differences between samples.

适用领域

▶验证已知的蛋白质相互作用：在植物体内直观地确认两个蛋白是否互作。

▶筛选互作蛋白：可用于筛选与某个目标蛋白（“诱饵”）发生相互作用的未知蛋白（“猎物”）。

▶研究植物-病原菌互作：特别适合于研究植物抗病蛋白（R蛋白）与病原菌效应蛋白之间的直接相互作用，这对于理解抗病机制至关重要。