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ClearColi BL21(DE3)Chemically Competent Cell
ClearColi BL21(DE3)来源于BL21(DE3) ,在BL21(DE3)中引入8个独立基因突变,导致ClearColi BL21(DE3)细胞壁外层的脂多糖(LPS)被修饰;LPS的低聚糖链被删除,同时LPS的两个酰基链也被删除,破坏了ClearColi BL21(DE3)大肠杆菌的内毒素信号通路;正常的LPS含有六个酰基链,含有六个酰基链的LPS可以被受体TLR4识别,激活内毒素反应,而只含有四个酰基链的LPS不能被TLR4识别,因此不触发内毒素反应。 从ClearColi BL21(DE3)细胞中提取的蛋白或质粒DNA中的内毒素含量极低,提取的无内毒素蛋白或多肽广泛应用于哺乳动物试验,疾病治疗等。ClearColi BL21(DE3)同时为Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株,这两种酶的缺失有效防止异源蛋白在大肠杆菌体内的降解,提高了目标蛋白的稳定性和表达量。 λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于ClearColi BL21(DE3)的染色体上,可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。ClearColi BL21(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒(2686bp,AmpR)检测转化效率>107 cfu/μg DNA。
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