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DH5α
DH5α是大肠杆菌(Escherichia coli)中应用最为广泛的经典克隆菌株之一,其主要特点在于其高效的DNA重组缺陷特性。该菌株的recA1和endA1基因突变是其核心优势:recA1突变使其同源重组能力缺失,从而极大提高了外源质粒DNA的稳定性,避免插入片段发生不期望的重排;endA1突变则使其核酸内切酶I失活,在质粒小量制备中能够产出更高质量、更高产量的质粒DNA。此外,DH5α还含有lacZΔM15基因缺失,可与pUC系列等载体进行蓝白斑筛选,方便快速地鉴定阳性重组克隆。其基因型中的hsdR17 (rK–, mK+) 使其成为限制系统缺陷但修饰系统完整的K-12衍生菌,有利于外源DNA的转化。由于这些特性,DH5α在分子生物学实验中成为质粒构建、扩增、保存以及常规基因克隆的首选宿主,以其高转化效率、良好的稳定性和操作简便性而备受青睐。
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