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YTK12
YTK12 是一个蔗糖酶外泌缺陷型酿酒酵母,该酵母广泛用于分析鉴定分泌蛋白的信号肽。蔗糖酶转化基因 SUC2 能够将棉子糖或蔗糖转化成酵母可以利用的葡萄糖,酵母信号肽追踪系统中使用的 pSUC2 载体含有蔗糖酶基因 suc2,但其为丧失了分泌活性的缺失信号肽序列的基因。YTK12 酵母菌株则为 suc2 基因缺陷型菌种,无法在以棉子糖为单一碳源的YPRAA 培养基上正常生长。只有将具有分泌活性的信号肽序列连接在 pSUC2 载体蔗糖酶基因 suc2 的 N 端,转化入 YTK12 酵母菌株中,才能使蔗糖转化酶正常分泌,YTK12 酵母才能将棉子糖转化为葡萄糖,在 YPRAA 培养基上正常生长(Jacobs et al 1997,Oh et al 2009)。同时,可以用显色反应来进一步验证结果,因为 SUC2 的酶活产物可以将 2,3,5-三苯基四唑氯(TTC)还原为不溶性的红色 1,3,5-三苯基甲酸(TPF),该方法已被广泛用于研究信号肽的功能。
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