LexA-MSII酵母三杂

服务介绍

酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与RNA间的相互作用。在酵母三杂交系统中，RNA蛋白质相互作用导致报道基因的转录，可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与RNA的相互作用。本试剂盒选用的YBZ-1菌株是在L40 Coat菌株的基础上对MS2外壳蛋白进行了一些结构改变，如将第55个氨基酸由N突变为K，并对MS₂(N55K)通过9个氨基酸linker连接两个MS₂外壳蛋白序，以增加RNA与蛋白之间的亲和力来提高筛选效率。

服务优势

▶技术靶向精准，聚焦核心研究需求；

▶定制化YBZ-1菌株，大幅提升筛选效率；

▶多维度检测体系，结果可靠可验证；

▶可与我司互作实验进行衔接，整个实验可以畅通且快速地完成。

服务流程

文案展示

Expanding the binding specificity for RNA recognition by a PUF domain

期刊：nature communications

Yeast three-hybrid assays show the binding of the wild-type PUF domain andQFR/VFQ variant. The negative control is a wild-type PUF domain that has stop codons in the TRM locations (repeat 1) paired with wild-type RNA. SC-L,synthetic complete media minus leucine; SC-L-H, synthetic complete media minus leucine and histidine. C Spot dilution plate assay indicates the binding of the design 1 and design 2 PUF domains to their target RNAs. The negative control is as in (B). The starting OD600 that was spotted was 0.05, with three sequential 10-fold serial dilutions shown.

适用领域

▶酵母三杂交系统：这是其最经典应用。用于筛选与已知 RNA 相互作用的蛋白质，或验证 RNA - 蛋白质间的特异性结合。例如，构建含 MS2 茎环的 RNA 诱饵，与 cDNA 文库表达的、带激活域的蛋白质共转染含 LexA - MS2 的酵母菌株，通过报告基因表型筛选阳性相互作用对。

▶RNA 定位与转录调控研究：可将特定 RNA 靶向到基因组特定 DNA 位点（如含 lexAop 的区域），用于研究 RNA 在染色质层面的调控功能，或构建基于 RNA 的转录激活/抑制系统。

▶RNA - 蛋白质相互作用的体外验证：纯化的 LexA - MS2 融合蛋白可用于体外下拉实验，富集结合 MS2 茎环标记 RNA 的蛋白质复合物，辅助后续质谱鉴定等分析。