BiFC

服务介绍

将荧光蛋白在某些特定的位点切开，形成不发荧光的N端和C端2个多肽，称为N片段(N-fragment)和C片段(C-fragment)。这2个片段在细胞内共表达或体外混合时，不能自发地组装成完整的荧光蛋白，在该荧光蛋白的激发光激发时不能产生荧光。但是，当这2个荧光蛋白的片段分别连接到1组有相互作用的目标蛋白上，在烟草叶片细胞内共表达这2个融合蛋白时，由于目标蛋白质的相互作用，荧光蛋白的2个片段在空间上互相靠近互补，重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子，并在该荧光蛋白的激发光激发下，发射荧光。简言之，如果目标蛋白质之间有相互作用，则在激发光的激发下，产生该荧光蛋白的荧光。反之，若蛋白质之间没有相互作用，则不能被激发产生荧光。

服务优势

▶高特异性：只有当目标蛋白相互作用时，荧光信号才会出现，减少了假阳性结果，提高了检测的特异性。

▶检测弱或瞬时相互作用：对低亲和力、短暂相互作用敏感，能够揭示一些传统方法难以检测到的相互作用。

服务流程

文案展示

A plant RNA virus inhibits NPR1 sumoylation and subverts NPR1-mediated plant immunity

期刊：nature communications

Confocal microscopic photographs of N. benthamiana epidermal cells that were infiltrated by agrobacteria harboring the indicated plasmids at 2 dpi. Scalebar, 50 μm. The experiment was independently repeated three times with similar results. c.

适用领域

▶蛋白质互作网络研究：揭示复杂信号通路中蛋白质间的直接相互作用。

▶药物筛选与验证：检测候选药物对特定蛋白质相互作用的影响，评估其生物活性。

▶植物科学：研究植物生长发育、逆境响应、信号传递等过程中的关键蛋白质互作。