信号肽分泌功能检测

服务介绍

检测蛋白信号肽是否具有分泌功能，确认蛋白质是否为分泌蛋白，在基础研究与生物技术应用上都具有核心意义，它直接关系到蛋白质能否被正确运输并发挥预期功能，它不仅回答了基础生物学中“蛋白去哪工作”的问题，更在现代生物技术中解析病原微生物（如细菌、真菌）效应蛋白的致病机制中起到关键作用。

信号肽分泌酵母检测：

信号肽分泌酵母检测采用pSUC2酵母分泌系统，利用缺失蔗糖转化酶基因的酵母菌株YTK12，该菌株在以蔗糖为唯一碳源的培养基上不能生长。选用的载体质粒 pSUC2 含有色氨酸合成基因和一个缺失信号肽与起始密码子 ATG 的蔗糖转化酶基因 SUC2。当待验证的信号肽连接到 pSUC2 的蔗糖转化酶基因之前，若信号肽具有分泌功能，可恢复蔗糖转化酶的分泌功能，使 YTK12 菌株能在以棉子糖为碳源的缺陷型培养基上生长，还可通过 TTC 显色反应进一步验证。

烟草叶片信号肽检测：

烟草叶片信号肽检测采用卵菌中致病疫霉的无毒效应蛋白avr3a和寄主中对应的马铃薯抗病基因R3a，R3a在植物细胞内可以识别Avr3a，引起细胞坏死。当Avr3a被融合表达的信号肽分泌到植物细胞外时，则不能被R3a识别，从而不能引起细胞坏死。

服务优势

▶实验结果可靠、图片美观；

▶除了效应蛋白信号肽检测实验外，还可以提供效应蛋白诱导/抑制细胞程序性死亡检测等业务，可以进一步丰富实验内容。

服务流程

信号肽分泌酵母检测

烟草叶片信号肽检测

文案展示

The Puccinia triticina effector Pt3372 suppresses wheat innate immunity by targeting wheat TaERP3 in TcLr2a and TcLr18

期刊：Phytopathology Research

Pt3372 signal peptide has a secretory function. Functional validation of the putative N-terminal signal peptide of Pt3372 was carried out using the yeast invertase secretion assay and with 2,3,5-triphenyltetrazoliu chloride (TTC). a The recombinant vector pSUC2-SP3372 carrying Pt3372 signal peptide was transferred into YPRAA. pSUC2-SP3372 showed that only the signal peptide had secretory function could grow normally in YPRAA. b The Pt3372 ORF sequence and the ORF sequence without the signal peptide were fused in-frame to the invertase sequence in the pSUC2 vector. The pSUC2-Pt3372 and pSUC2-Pt3372ΔSP were used to indicate that only the yeast strain capable of secreting invertase could react with 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride (TTC) and reduce it to insoluble red 1,3,5-triphenyl formazan (TPF).

适用领域

▶鉴定目标蛋白信号肽的分泌功能，明确蛋白亚细胞定位与运输机制。

▶高通量筛选高效信号肽序列，优化重组蛋白（酶、抗体等）的分泌表达效率。

▶解析病原微生物效应蛋白的分泌机制，助力致病机理研究与药物靶点开发。