酵母磷转运缺陷株互补验证

服务介绍

EY917是一种用于植物磷转运蛋白功能研究的酿酒酵母工程菌株。其关键特性是基因组中多个内源磷转运蛋白基因（如pho84、pho87、pho89、pho90和pho91）被敲除，导致自身无法吸收磷离子，成为磷转运缺陷型。为了确保菌株在实验操作中存活，EY917还包含一个受半乳糖诱导的GAL1启动子，并表达酵母自身的PHO84转运蛋白基因的质粒。因此，在培养和扩增该菌株时，需要在以半乳糖为碳源的培养基中培养。R196 是酿酒酵母蛋白高效表达载体，筛选标记为Ura3。将磷酸盐转运蛋白编码的基因X构建到pDR196 载体中(pDR196-X)，将其转化EY917感受态细胞，X蛋白就会介导酵母细胞吸收磷酸盐，进而使得EY917酵母菌能够在含磷酸盐的培养基中正常生长。

服务优势

▶可检测蛋白是否具有磷离子吸收转运活性，简单高效。

▶本司有磷离子转运活性检测所需的全部试剂、菌株和载体。

服务流程

文案展示

Expressing Phosphate Transporter PvPht2;1 Enhances P Transport to the Chloroplasts and Increases Arsenic Tolerance in Arabidopsis thaliana

期刊：Environmental Science & Technology

P and As transport activity of PvPht2;1 in a yeast mutant. (a) Complementation of PvPht2;1 in yeast mutant EY917 defective in P uptake under different P concentrations (1−50 mM P). (b,c) Growth curves of yeast cells expressing PvPht1;3.

适用领域

▶磷转运蛋白功能鉴定：鉴定植物、微生物、动物来源的候选磷转运蛋白基因的体内转运功能，明确目标基因是否具备介导磷离子跨膜吸收的核心活性，是基因功能验证的关键技术手段。

▶植物逆境生理研究：解析作物在缺磷、重金属胁迫等逆境下，磷转运蛋白在维持细胞内磷离子稳态中的作用；筛选耐低磷或磷高效利用的作物基因，为养分高效利用育种提供靶点。

▶微生物磷代谢机制解析：研究细菌、真菌等微生物的磷转运系统，明确磷转运蛋白在微生物适应磷匮乏环境、维持酶活性（如磷超氧化物歧化酶）中的调控机制。

▶磷转运蛋白突变体/变体功能筛选：对磷转运蛋白的不同突变体、等位变体进行功能验证，评估氨基酸位点突变对转运活性的影响，助力蛋白结构 - 功能关系研究。