酵母铁转运缺陷株互补验证

服务介绍

铁（Fe）元素是植物生长必需的“微量营养元素”，主要以“酶的辅助因子”（如铁硫蛋白、血红素蛋白）参与光合作用、呼吸作用、氮代谢和DNA合成与修复等核心过程，虽然需求量不大，但作用极为关键。铁缺乏时，叶绿素合成受阻，光合效率下降；电子传递链受损，能量代谢紊乱；生长停滞。过量的铁，也会导致催化产生大量活性氧，导致“氧化应激”，破坏膜结构和细胞功能，老叶出现“褐色或紫色斑点”，根系变褐、生长受抑制。

酵母铁盐转出检测：

△ccc1是一种用于研究金属离子稳态的酿酒酵母基因工程菌株。该菌株通过基因敲除技术缺失了CCC1基因，该基因编码一个定位于液泡膜的锰/铁转运蛋白，其主要功能是将细胞质中的铁（Fe²⁺）和锰（Mn²⁺）离子转运并储存于液泡内。因此，△ccc1突变体表现出细胞内铁离子稳态失衡，尤其是液泡铁存储能力下降，并可能影响线粒体等细胞器的铁利用。

酵母铁盐转入检测：

△fet3fet4是一种用于铁代谢研究的酿酒酵母基因工程菌株。该菌株通过基因敲除技术缺失了主要的铁转运蛋白编码基因FET3和FET4，导致其从环境中摄取铁的能力严重受损，成为铁离子吸收缺陷型。这种缺陷使其生长高度依赖培养基中的铁浓度，在低铁条件下生长受限。该菌株主要用于研究铁离子转运、铁代谢调控机制以及筛选具有铁转运功能的外源基因或化合物。

服务优势

▶可检测蛋白是否具有铁离子吸收转运活性，简单高效。

▶本司有铁离子转运活性检测所需的全部试剂、菌株和载体。

服务流程

文案展示

(1) 酵母铁盐转出检测

Vacuolar-Iron-Transporter1-Like Proteins Mediate Iron Homeostasis in Arabidopsis

期刊：PLOS ONE

Complementation of the Dccc1 by heterologous expression of the VTL genes. Dccc1 (vacuolar Fe2+/Mn2+ transporter) cells were transformed with each of the three VTL genes or the empty vector (pUE) under the control of the PGK promoter and grown on SD medium containing FeSO4 at the concentrations indicated for 24 or 48 h at 30uC. Cells were plated at the densities indicated in the figure.

(2) 酵母铁盐转入检测

Characterization of Divalent Metal Transporter 1 (DMT1) in Brugia malayi suggests an intestinal-associated pathway for iron absorption

期刊：IJP: Drugs and Drug Resistance

Functional analysis of BmDMT1 in yeast. The fet3fet4 mutant yeast strain was transformed with BmDMT1 or the empty PYES2 expression vector. The DY150 parent strain was used as a positive control and transformed with either BmDMT1 or the empty vector. Serially diluted cells were spotted on URAselective plates supplemented with either A. 100 μM or 200 μM ferrous ammonium sulfate, or B. 2 μM or 20 μM ferric chloride.

适用领域

▶铁转运蛋白功能鉴定：鉴定植物、微生物、动物来源的候选铁转运蛋白基因的体内转运功能，明确目标基因是否具备介导铁离子跨膜吸收的核心活性，是基因功能验证的关键技术手段。

▶植物逆境生理研究：解析作物在缺铁、重金属胁迫等逆境下，铁转运蛋白在维持细胞内铁离子稳态中的作用；筛选耐低铁或铁高效利用的作物基因，为养分高效利用育种提供靶点。

▶微生物铁代谢机制解析：研究细菌、真菌等微生物的铁转运系统，明确铁转运蛋白在微生物适应铁匮乏环境、维持酶活性（如铁超氧化物歧化酶）中的调控机制。

▶铁转运蛋白突变体/变体功能筛选：对铁转运蛋白的不同突变体、等位变体进行功能验证，评估氨基酸位点突变对转运活性的影响，助力蛋白结构 - 功能关系研究。