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pML105载体
pML105载体是以pML104为骨架,将Ura筛选Marker替换成Trp,属 CRISPR/Cas9 酿酒酵母基因编辑系统,核心结构包含 Cas9 核酸酶编码基因(由 GAP promoter启动子驱动)和单一向导 RNA(sgRNA)表达盒(由SNR52 promoter启动子调控)。通过在 sgRNA 表达盒中插入靶向特定基因的向导序列,可引导 Cas9 蛋白在酿酒酵母基因组的靶位点产生双链断裂,进而通过非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)机制引入基因突变。适用于酿酒酵母基因功能研究中的定点突变、基因敲除及碱基编辑。
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